The Real Ghostbusters melanjutkan cerita dari film pertama, di mana keempat Ghostbusters menghadapi kekuatan supernatural. Yang akan membantu para Ghostbusters adalah sekretaris mereka, Janine Melnitz, dan (akhirnya) Louis Tully. Turut bergabung pula hantu hijau yang berhasil ditangkap di Sedgewick Hotel pada film pertama, yang diberi nama Slimer.