Spider-Man (1994) menceritakan kisah Peter Parker yang berusia 19 tahun di tahun pertamanya di Empire State University, dan alter-egonya, Spider-Man. Serial ini menampilkan musuh-musuh klasik Spider-Man, termasuk Kingpin, Green Goblin, Lizard, Scorpion, Doctor Octopus, Mysterio, Rhino, Shocker, The Vulture, dan Chameleon, serta musuh-musuh yang lebih baru seperti Venom, Carnage, dan Hobgoblin.