The Lion Guard akan menceritakan upaya Kion, putra bungsu Simba dan Nala, untuk mengumpulkan tim hewan demi melindungi Pride Lands. Beberapa karakter dari The Lion King, sekuelnya tahun 1998 The Lion King II: Simba's Pride, dan The Lion King 1½ tahun 2004, akan muncul seperti Kiara, Timon, Pumbaa, Rafiki, Zazu, Simba, Nala, dan Mufasa. Serial ini juga akan menampilkan karakter baru termasuk seekor cheetah bernama Fuli, seekor kuda nil bernama Beshte, seekor burung bangau bernama Ono, dan seekor luwak madu bernama Bunga, yang akan menjadi teman Kion.