Ambientada en una Tierra futura, Defiance presenta a los jugadores y espectadores un mundo donde humanos y alienígenas coexisten en un planeta devastado por décadas de guerra y transformado por máquinas de terraformación alienígenas. La historia se centra en Jeb Nolan, el guardián de la ley en un bullicioso pueblo fronterizo que es uno de los pocos oasis de civilidad e inclusión en el nuevo mundo. Nolan es un exmarine que luchó en el conflicto alienígena y sufrió la pérdida de su esposa e hijo en la guerra. El trauma lo transformó en un solitario vagabundo en las tierras salvajes de este nuevo y peligroso mundo.