Game On! mempertemukan dua tim yang masing-masing beranggotakan tiga orang, dipimpin oleh Venus Williams dan Rob Gronkowski, bersama komedian Bobby Lee dan Ian Karmel, serta campuran bintang olahraga, komedian, dan selebriti yang berganti-ganti. Tim-tim ini akan saling berhadapan dalam tantangan fisik yang luar biasa—mulai dari melihat siapa yang bisa memasukkan bola basket terbanyak ke dalam ring di atas tangki air sambil terikat tali bungee, hingga berhadapan dengan pegulat sumo di arena. Pengetahuan mereka yang berkaitan dengan olahraga juga akan diuji melalui pertanyaan trivia.